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方法：

⒈粗酶液的制備

用電子天平分別稱取粗脂肪酶0.010 g、0.020 g 和0.030 g， 用蒸餾水溶解并定容至100 mL， 配成濃度分別為0.01%、0.02% 和0.03%的粗酶液。

⒉實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

本實(shí)驗(yàn)以10 mL色拉油為底物，以酶用量、水解溫度、反應(yīng)時(shí)間為因素，通過(guò)酸價(jià)的測(cè)定選定其水解的條件。

⒊酸價(jià)的測(cè)定

酸價(jià)是指中和1 mol游離脂肪酸所需NaOH的毫克數(shù)， 它用于衡量油脂的水解程度。實(shí)驗(yàn)中用酸堿滴定法測(cè)定水解液的酸價(jià)， 參照文獻(xiàn)[ 3， 4 ]中所使用的方法， 向所得的水解液滴加1 mL 95%的乙醇溶液， 搖勻， 終止反應(yīng)， 并加入2滴酚酞指示劑， 迅速用0.05 mol/L的NaOH溶液滴定至溶液呈微紅色， 在30 s內(nèi)不消失為終點(diǎn)， 記錄消耗的NaOH溶液毫升數(shù)（V）。用同樣的方法測(cè)定空白值， 每個(gè)試驗(yàn)重復(fù)兩次， 以平均值作為測(cè)定結(jié)果。